Oliqo sintezatorunun prinsipi
Molekulyar biologiya və genetika tədqiqatları sahələrində DNT-ni sintez etmək qabiliyyəti həlledici rol oynayır.DNT sintezi nukleotidləri müəyyən bir ardıcıllıqla düzərək DNT molekullarının süni istehsalını əhatə edir.Buna nail olmaq üçün elm adamları oliqonukleotid sintezatoru kimi tanınan, həmçinin DNT sintezatoru kimi tanınan güclü alətə güvənirlər.
Oliqonukleotid sintezatoru oliqonukleotidlər adlanan qısa DNT molekullarını avtomatik sintez edən mürəkkəb alətdir.Bu qısa DNT zəncirləri adətən 10 ilə 100 nukleotid uzunluğundadır və polimeraza zəncirvari reaksiya (PZR), gen sintezi, gen mühəndisliyi və DNT ardıcıllığı daxil olmaqla müxtəlif tətbiqlərdə əsas tikinti bloklarıdır.
Oliqonukleotid sintezatorları kimi tanınan bir texnika prinsipi əsasında fəaliyyət göstərirbərk fazalı sintez.Bu üsul ilk dəfə 1970-ci illərdə Nobel mükafatı laureatı Dr. Marvin Caruthers tərəfindən irəli sürülüb və DNT ardıcıllığının sintezini artırmaq üçün illər ərzində təkmilləşdirilib.Oliqonukleotidlərin sintezi istənilən ardıcıllıq yığılana qədər böyüyən zəncirin 5'-terminusuna nukleotid qalıqlarının mərhələli əlavə edilməsi ilə həyata keçirilir.Hər bir əlavə sintez dövrü adlanır və dörd kimyəvi reaksiyadan ibarətdir:
Addım 1: Blokdan çıxarma (detritilasiya) ---------Addım 2: Birləşdirmə ---------Addım 3: Qapaq -----------Addım 4: Oksidləşmə
İstənilən ardıcıllıq əldə olunana qədər bu proses hər bir nukleotid üçün təkrarlanır.Daha uzun oliqonukleotidlər üçün, bütün ardıcıllığı sintez etmək üçün bu dövrü bir neçə dəfə təkrarlamaq lazım ola bilər. Sintez dövrünün hər bir addımını dəqiq idarə etmək bacarığı oliqonukleotid sintezatoru üçün çox vacibdir.Dəqiq və səmərəli sintezi təmin etmək üçün nukleotidlər və aktivatorlar kimi istifadə olunan reagentlər yüksək keyfiyyətli olmalıdır.Bundan əlavə, sintezatorlar istənilən birləşmə reaksiyalarını təşviq etmək və arzuolunmaz reaksiyaların qarşısını almaq üçün yüksək dəqiqlikli temperatur nəzarəti və digər ətraf mühit şəraitini tələb edir.
Oliqonukleotid tam sintez edildikdən sonra o, adətən bərk dayaqdan ayrılır və qalan qoruyucu qrupları və ya çirkləri çıxarmaq üçün təmizlənir.Təmizlənmiş oliqonukleotidlər daha sonra aşağı axın tətbiqləri üçün hazırdır.
Texnologiyanın inkişafı eyni vaxtda yüzlərlə, hətta minlərlə oliqonukleotidi sintez etməyə qadir olan yüksək məhsuldarlıqlı oliqonukleotid sintezatorlarının inkişafına imkan yaratdı.Bu alətlər tədqiqatçılara müxtəlif tədqiqat məqsədləri üçün sürətlə böyük oliqonukleotid kitabxanaları yaratmağa imkan verən mikroarray əsaslı sintez texnologiyasından istifadə edir.
Xülasə, oliqonukleotid sintezatorlarının arxasında duran prinsiplər möhkəm dayağa nukleotidlərin mərhələli əlavə edilməsini nəzərdə tutan bərk fazalı sintez üsulları ətrafında fırlanır.Sintez dövrünə dəqiq nəzarət və yüksək keyfiyyətli reagentlər dəqiq və səmərəli sintez üçün vacibdir.Oliqo sintezatorları DNT tədqiqatında mühüm rol oynayır, elm adamlarına müxtəlif tətbiqlər üçün xüsusi oliqonukleotidlər yaratmağa imkan verir, biotexnologiya və genetik tədqiqatda irəliləyişlərə töhfə verir.
Göndərmə vaxtı: 01 avqust 2023-cü il