Oliqonun təmizlənməsi üçün təmizləyici avadanlıq

1. Gel Elektroforez Xromatoqrafiyasının Təmizlənməsi
Təmizləmə üçün denaturasiya edən poliakrilamid gel elektroforez xromatoqrafiyasından istifadə edin.Denatürasiya edən agent ümumiyyətlə 4M formamid və ya 7M karbamiddir, akrilamidin konsentrasiyası 5-15% arasındadır və metakrilamidin nisbəti əsasən 2-10% arasındadır.
Elektroforezdən sonra ultrabənövşəyi işığın şüalanması altında nuklein turşusu zolağının mövqeyini təyin etmək lazımdır, hədəf nuklein turşusunu ehtiva edən gel kəsilir, nuklein turşusu parçalanır və yuyulur, sonra yuyulma məhlulu konsentrasiya edilir, duzsuzlaşdırılır, kəmiyyətlə müəyyən edilir və liyofilləşir.

2. DMT-On, HPLC Təmizləmə
Sintez zamanı DMT-On rejimini seçin, xam məhsul sentrifuqa edildi və aminolizdən sonra artıq ammonyakın çıxarılması üçün otaq temperaturunda konsentrasiya edildi.
Ayırma eluent kimi asetonitril və 10% trietilamin-sirkə turşusu (TEAA) olan C18 sütunundan istifadə edilməklə həyata keçirilmişdir.Elüsyon tamamlandıqdan sonra konsentrasiya edilir, sonra DMT qrupu trifluoroasetik turşu ilə çıxarılır.Zərərsizləşdirildikdən sonra bəzi duzlar və kiçik molekullar kəsici boru vasitəsilə çıxarılır və nəhayət duzsuzlaşdırılır.

Bu üsul daha yüksək təmizliyə malik məhsul əldə edə bilər, lakin depurinasiyanın baş verməsinə diqqət yetirmək lazımdır.

3. DMT-Off, HPLC Təmizləmə
Sintez zamanı DMT-Off seçin və xam məhsul ammonolizdən sonra artıq ammonyakın çıxarılması üçün oda temperaturunda sentrifuqa edildi və konsentrasiya edildi.
Ayırma asetonitril və suda 10% trietilamin-sirkə turşusu olan C18 sütunundan istifadə edərək, eluent kimi həyata keçirildi.Ayrılma başa çatdıqdan və kəmiyyəti müəyyən edildikdən sonra alikvotlar liyofilləşdirilir.

Bu üsul ayrılma şəraitinin diqqətlə tənzimlənməsini tələb edir və nisbətən təmiz hədəf molekulları da əldə edə bilir.