DNT sintezinin əsas prinsipi

Kimyəvi DNT sintezi bərk fazalı sintez strategiyasına və fosforamidit kimyasına əsaslanır.Bioloji DNT sintezindən fərqli olaraq, kimyəvi DNT sintezində material Şəkil 1-də göstərildiyi kimi DMT (4, 4-dimetoksitritil) və fosforamiditlə dəyişdirilmiş deoksiriboksiddir. DNT sintezi bərk dayaq üzərində aparılır(biz müxtəlif üsullar təklif edə bilərikOliqo sintez sütunu), yəni CPG (idarə olunan məsamə şüşəsi) və PS (polistirol) və bütün sintez birDNT/RNT sintezatoruƏsas avadanlığımız olan , müxtəlif modellərə malikdir: HY Tək Kanal Sintezatoru, HY-12, HY-192 və s, sintez istiqaməti 3'-dən 5'-ə qədərdir və bir vasitəsilə bərk dəstəyə bir nukleotid daxil edilir. sintez dövrü.Tipik olaraq sintez dövrü dörd addımdan ibarətdir, qorunmanın aradan qaldırılması, birləşmə, bağlama və oksidləşmə (Şəkil 2).Mühafizəsizləşdirmə bərk dayaqdakı DMT qrupunu və ya əvvəlki nukleoziddəki 5' hidroksil qrupunu çıxarmaq üçün təyin edilmişdir, qoruyucu reagent kimi diklorometandakı 3% trixloroasetik turşu istifadə olunur.Sonra fosforamiditlə dəyişdirilmiş dezoksiriboksisid aktivatorun, yəni 5-etiotetrazolun və ya 4,5-disiyanoimidazolun köməyi ilə fosfitetriesteri (III) əmələ gətirərək hidroksil qrupunu ifşa etməyə icazə verildi və Birləşmə mərhələsini həyata keçirdi.Birləşmə mərhələsi zamanı reaksiyaya girməyən hidroksil qrupunu bloklamaq, arzuolunmaz qüsur ardıcıllığının əmələ gəlməsini minimuma endirmək üçün qapaq mərhələsi həyata keçirilir.Nəhayət, qeyri-sabit fosfitetriester (III) piridin hazırkı oksidləşdirici kimi yod ilə kimyəvi stabil fosfortriesterə (V) oksidləşir.

Sintez edilmiş DNT bərk dayaqdan aminoliz yolu ilə ayrıla bilər, fosfortriesterdə 2-siyanoetillə qorunan qrup və nukleobazda amid eyni vaxtda parçalanır, stellajlarda olan Sintez Plitələri və Sintez Sütunları birbaşa reaksiya kamerasına yerləşdirilir. -ninQoruyucu Avadanlıq.Xam DNT istəyə görə HPLC, elektroforez və OPC ilə hazırlana bilər, biz də sizə təqdim edə bilərikTəmizləmə avadanlığıPost-emal üçün.